· polyacrylamidejeli gbọdọ nipasẹ acrylamide monomer, polymerization ti o bere ohun elo, ayase, ati awọn ọtun ti iyọ ati ifipamọ adalu papo.
· akirilamideati BIS (N, N '- methylene ė acrylamide) jẹ matrix gel fọọmu monomer.
· ammonium persulfate bẹrẹ alemora polymerization ilana.Ilana ti lẹ pọ nilo 10% ammonium persulfate ojutu ti a pese sile ninu omi.Pupọ julọ alaye naa tọka si iwulo fun lilo lọwọ.Sibẹsibẹ, 10% ojutu le wa ni gbe ni 4 ℃ fun orisirisi awọn ọsẹ lai significant isonu ti aṣayan iṣẹ-ṣiṣe.Ṣe to milimita 10 ki o sọ ọ silẹ nigbati lẹ pọ ba kuna lati ṣajọpọ.
Italologo: Awọn ogorun tiakirilamideni lesese lẹ pọ ati amuaradagba lẹ pọ ni ko kanna.Ti o ba nlo acrylamide premade: ojutu BIS, rii daju pe o gba igo to tọ.
· TEMED (N, N, N ', N'- tetramethyl ethylenediamine) jẹ ayase, ninu igo brown kan, ti a gbe sinu firiji.Fi kun ṣaaju ki o to dà lẹ pọ.
· polyacrylamide electrophoresis ti a lo gilasi ni electrophoresis yẹ ki o fo ṣaaju ati lẹhin akoko kọọkan.Lẹhin electrophoresis, wẹ pẹlu fẹlẹ rirọ ati asọ ninu omi ọṣẹ gbigbona, fi omi ṣan pẹlu omi distilled ki o duro lati gbẹ.
· ọrinrin ati eruku le fa pẹlu polima ṣofo.Ṣaaju ki o to electrophoresis, nu awo gilasi pẹlu olutọpa gilasi ki o mu ese rẹ pẹlu fẹlẹ rirọ.Wẹ pẹlu omi distilled ati ki o gbẹ daradara pẹlu parẹ iwe.Rinsing pẹlu 70% ethanol ṣaaju ki o to parẹ pẹlu iwe ṣe iranlọwọ lati nu ati ki o yara gbigbe.Ṣafikun awọn apẹẹrẹ ti acrylamide ni itẹlera: BIS, omi, ojutu ifipamọ, ammonium persulfate, TEMED.Gbọn daradara ki o tú lẹsẹkẹsẹ.
Ko ṣe pataki lati degass polyacrylamide ṣaaju ki o to polymerization.(Acrylamide lo lati gbe sinu igbale lati yọ awọn nyoju kuro nitori atẹgun ṣe idiwọ polymerization.)
Petele lẹ pọ ojuami awọn italolobo ayẹwo.
· fi kan nkan ti dudu iwe ni isalẹ apoti, dudu lẹhin lati ṣe diẹ ninu awọn ayẹwo iho lati ri siwaju sii kedere.
· lẹ pọ ojò kún saarin, o kan lori colloid.
· ti eti ba ni ina, tan awọn ina, jẹ ki ina tan colloid.Fa apẹẹrẹ sinu pipette.
· lilo ẹrọ pipetting laifọwọyi.
· ni 10-200 mu 1 aaye gbigbe omi le ṣee lo ni pupọ julọ awọn aaye lori apẹẹrẹ.Fun awọn iho apẹẹrẹ kekere pupọ (kere ju 10μ1), ori pipette gigun ti a lo fun lẹ pọ le tẹle jẹ irọrun diẹ sii.
· pipetting kan immersed ni awọn ayẹwo, simi laiyara gbigbe omi.Apeere naa le han alalepo pẹlu glycerin, ati fifa iyara le fa awọn nyoju afẹfẹ sinu ori pipette.
· awọn ayẹwo lẹhin ifasimu ori pipetting, yoo gbe ori ito rọra si eti paipu tabi mimu iwe mu ori omi mu ni ita ti awọn droplets.Ṣọra ki o ma ṣe mu ayẹwo naa.
Gbe awọn ayẹwo sinu iho ayẹwo
· ẹrọ pipetting lati tọju titẹ diẹ, jẹ ki awọn ayẹwo diẹ gbe ori omi ti o pọ ju.
· ori pipetting ti a fi sii sinu ifipamọ, die-die ti o ga ju awọn ihò iranran, ṣetọju titẹ rere.Awọn sample ti pipette le fi sii sinu iho kekere kan.
· laiyara ati ni imurasilẹ awọn ayẹwo jade.Awọn sample pipette ti wa ni gbe loke iho ayẹwo ojuami, ati awọn ayẹwo yoo rì sinu iho.Jẹ ki ayẹwo rii lati kun iho ayẹwo dipo titari sinu.
· ni kete ti awọn ayẹwo ti o kẹhin pẹlu ori omi, omi yoo gbe lọ si ẹsẹ keji, gbe omi soke laiyara, gbe jade kuro ninu ifipamọ
Bii o ṣe le ṣe iṣayẹwo lẹ pọ inaro?
· inaro lẹ pọ ojuami ayẹwo ihò akoso laarin meji ona ti gilasi.Ni lẹ pọ tinrin pupọ, ori pipette ko le paapaa fi sii laarin awọn awo gilasi meji.Wo glycerin!Fi ori pipette sori iho ayẹwo ati apẹẹrẹ yoo rì sinu iho naa.
· ojuami ayẹwo ṣaaju ki o to, jẹ daju lati fi awọn inaro ojuami ti polypropylene acyl jeli ayẹwo iho ti wa ni ṣan mọ.Wẹ acrylamide ti ko ni polymerized kuro ati omi ti o le han ni isalẹ iho ayẹwo.Omi le ṣe awọn ayẹwo iho significantly kere.Lo syringe 25ml tabi 50ml ati abẹrẹ 18 kan.Tú sinu saarin electrophoresis ati ki o farabalẹ fọ iho ayẹwo naa.
· o le jẹ soro lati ri iho ayẹwo, sugbon ni kanna, awọn iyokù jẹ rorun.Ti awọn iho ti o pọju ba wa, a le ṣe idanwo idaduro ayẹwo pẹlu buluu bromophenol.
Akoko ifiweranṣẹ: Mar-31-2023